什么是限制性内切核酸酶--限制性内切核酸酶的作用机制

核酸内切酶和核酸限制性内切酶有什么区别？

区别：含义不同，作用不同。

一、含义不同：

核酸内切酶：在核酸水解酶中，为可水解分子链内部磷酸二酯键生成寡核苷酸的酶，与核酸外切酶相对应。

核酸外切酶： 核酸外切酶是一类能从多核苷酸链的一端开始按序催化水解3、5-磷酸二酯键，降解核苷酸的酶。

二、作用不同：

核酸外切酶的作册宴碧用：从核酸链的一端逐个水解下核苷酸。限制性核酸内切酶的作用：识别特定的核苷酸序列，并在DNA分子内部的一定位点切割DNA 。

核酸内切酶：大都不具碱基特异性，但也有诸如脾脏RNase、RNaseT1等或限制性内切酶那种能够识别并切断特定的碱基或碱基序列的酶。

分类

限制性核酸内切酶(以下简称限制性酶)是一类识别双链DNA中特定核苷酸序列的DNA水解酶，以州举内切方式水解DNA，产生5’-P和3’-OH末端。1952年Luria等及1953年Bertani等研究噬菌体时发现了宿主控制性现象祥哪。Arber及其同事用放射性同位素标记证明，噬菌体在新品系中的损害伴随有其DNA的降解，但宿主自己的DNA并不降解，据此他们提出了限制 - 修饰酶假说。

以上内容参考：百度百科-核酸内切酶

限制性内切核酸酶仅存在原核生物中吗?

不是。

限制性内切核酸酶(restriction enzyes)简称限制酶，最初是从原核生物中分离纯化来的，是细菌用于抗噬菌体侵染的剪除和切割噬菌体DNA的特殊的内切核酸酶。到目前为止已经从300多种不同的微生物中分离出了约500种限制性内数仔切核酸酶。

根据作用方式不同，限制性内切核酸酶又可分为I型薯坦汪、Ⅱ型、Ⅲ型酶。这三种不同类型的限制酶具有不同的特性，其中II型酶由于其内切核酸酶活性和甲基化活性是分开的，而且内切核酸酶作用又只有序信高列特异性，故目前在基因操作研究中应用广泛。

什么是限制性内切酶？

限制性内切酶是能够识别并附着双链DNA分子中特定脱氧核苷酸序列，并由此切割DNA双链磷酸二酯键的一类酶，并由此产生的两种切割末端，粘性末端和平齐末端。

影响限制性内切酶活性的因素有多种，稍有不慎，可能就会导致酶切反应的消激失败，除了常见的底物浓度、反应温度等因素，还有以下三种需额外注意。

1、保护碱基

酶蛋白在进行切割时，需占据识别宏激位点两边的若干个碱基，被称为保护碱基。

2、质粒高级结构

部分限制性内切酶无法切割高级结构的质粒，这时候就需适当加大酶的使用量，或用可适应高级结构的限制酶线性化质粒后再行切割。

3、甲基化保护

甲基化是细菌用来保护自蔽桥袜己的基因序列不被内源性内切酶切割的一种机制。常见甲基化：Dam+、Dcm+、EcoKI+、EcoBI+与CpG（真核细胞）等。在实验中一定要注意宿主细胞的甲基化信息。

扩展资料

限制作用实际就是限制酶降解外源DNA ，维护宿主遗传稳定的保护机制。

甲基化是常见的修饰作用，可使腺嘌呤A和胞嘧啶C甲基化而受到保护。通过甲基化作用达到识别自身遗传物质和外来遗传物质的目的。所以，能产生防御病毒侵染的限制酶的细菌，其自身的基因组中可能有该酶识别的序列，只是该识别序列或酶切位点被甲基化。

但并不是说一旦甲基化，所有限制酶都不能切割。大多数限制酶对DNA甲基化敏感，因此当限制酶目标序列与甲基化位点重叠时，对酶切的影响有3种可能，即不影响、部分影响、完全阻止。

对甲基化DNA的切割能力是限制酶内在和不可预测的特性，因此，为有效的切割DNA，必须同时考虑DNA甲基化和限制酶对该类型甲基化的敏感性。另外，大部分商业限制酶如今专门用于切割甲基化DNA。

参考资料来源：百度百科-限制性核酸内切酶

限制性内切酶和限制性核酸内切酶有什么区别

简单来说，二者是包含与被包含的关系，即限制性核酸内切酶是核酸内切酶的一种。

核酸内切酶：在核酸水解酶中，为可水解分子链内部磷酸二酯键生成寡核苷酸的酶，与核酸外切酶相对应。从对底物的特异性来看,可分为DNaseⅠ、DNaseⅡ等仅分解DNA的酶；脾脏RNase、RNaseT1等仅分解RNA的酶。如链孢霉的核酸酶就是既分解DNA又分解RNA的酶。一般来说，大都不具碱基特异性，但也有诸如脾脏RNase、RNaseT1等或限制性内切酶那种能够识别并切断特定的碱基或碱基序列的酶。

限制性核酸内切酶简介：30多年前，当人们在对噬菌体（细菌病毒）的宿主特异性的限制-修饰现象进行研究时，首次发现了限制性内切酶。细菌可以抵御新病毒的入侵，而这种"限制"病毒生存的族亩办法则可归功于细胞内部可摧毁外源DNA的限制巧含性内切酶。首批被发现的限制性内切酶包括来源于大肠杆菌的EcoR

I和EcoR

II，以及来源于Heamophilus

influenzae的Hind

II和Hind

III。这些酶可在特定位点切开DNA，将基因切割成小的基因片段。当限制性内切酶的应用在上世纪七十年代流传开来的时候，以NEB为代表的许多公司开始寻找更多的限制性内切酶。除了某些病毒以外，限制性内切酶只在原核生物中被发现。

核酸外切酶：

核酸外切酶是一类能从多核苷酸链的一端开始按序催化水解3、5-磷酸二酯键，降解核苷酸的酶。其水解的最终产物是单个的核苷酸（DNA为dNTP,RNA为NTP）。按作用的特性差异可以将其分为单链的核酸外切酶和双链的核酸外切酶。核酸外切酶的作用：从核酸链的一端逐个水解下核苷酸。限制性核酸兆宽森内切酶的作用：识别特定的核苷酸序列，并在DNA分子内部的一定位点切割DNA

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